Экспресс диагностика на сифилис порядок проведения ошибки. Лабораторные методы диагностики сифилиса

⁰

Среди венерических заболеваний занимает первые позиции по распространенности. Заболевание передается от больного к здоровому преимущественно половым путем. Диагностика сифилиса – сложный, поэтапный процесс, который не всегда приносит результат.

Подозрение на сифилис – к какому врачу идти?

Большое распространение заболевание получило потому, что многие молодые люди просто не знают, как определить сифилис, какие обследования необходимо пройти. Лечением половых инфекций занимаются врачи венерологи или дерматовенерологи, так как в большинстве случаев подобные инфекции сопровождаются повреждением кожных покровов. Медики советуют с профилактической целью обследоваться каждому пациенту репродуктивного возраста. Болезнь часто протекает в скрытой форме, поэтому выявить ее можно не всегда.

Методы диагностики сифилиса

Диагностические мероприятия по выявлению заболевания основываются на клинических и лабораторных данных. Диагноз «сифилис» ставится только после получения положительных результатов лабораторного исследования. Ранняя диагностика сифилиса исключает прогрессирование заболевания. Первичный сифилис определяется исследованием отделяемого твердого шанкра эрозивных папул. Среди основных методов лабораторной диагностики сифилиса необходимо выделить:

Бактериоскопию.
Серологическое исследование (специфическое и неспецифическое).
Гистологию (при ).
Микроскопию (исследование нативного препарата, отделяемого эрозивных или язвенных высыпаний, пунктата из лимфоузла).

Микробиологическая диагностика сифилиса

Основу данного типа обследования составляет бактериоскопический метод диагностики сифилиса. Он предполагает обнаружение T.pallidum в материале, забранном из очагов воспаления:

твердый шанкр;
эрозивные нарушения;
лимфоузлы;
спинной мозг.

Предварительно врач протирает место забора материала тампоном с физраствором, затем раздражает поверхность эрозии специальной петлей, пока из нее не покажется тканевая жидкость.

При этом избегают смешивания материала с кровью. Жидкость помещается на предметное стекло. Препарат, полученный таким способом, исследуется с помощью микроскопа. Методы микробиологической диагностики сифилиса основываются на обнаружении возбудителя в материале. При отрицательном результате исследование проводят несколько дней подряд для полного исключения болезни.

Серологическая диагностика сифилиса

Для выявления и подтверждения диагноза «сифилис» в случае поздних и скрытых форм болезней основы диагностики составляет серологический метод. В большинстве случаев для диагностики сифилиса используют . Метод предполагает исследование венозной крови пациентов, которые обнаруживают антитела к антигенам возбудителя. Такой анализ на бледную трепонему помогает выявить заболевание даже при отсутствии явных клинических симптомов.

В зависимости от состава используемых для диагностики веществ, серологические методы подразделяют на:

Специфические (трепонемные).
Неспецифические (нетрепонемные).

Трепонемные тесты

Трепонемные тесты – это метод диагностики, использующий в качестве основы специфические антигены Treponemapallidum. Метод используется как для постановки, так и для подтверждения диагноза, для дифференциальной диагностики сифилиса. Все специфические тесты имеют высокую чувствительность и точные результаты. Механизмы проведения специфических тестов неодинаковы, поэтому они имеют различные показания к применению. К трепонемным тестам относят следующие методы лабораторной диагностики сифилиса:

Реакцию связывания комплемента (реакция Вассермана, РВ) с трепонемным антигеном – РСКт.
Реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ.
Реакцию иммунофлюоресценции – РИФ. Применяется в нескольких модификациях: РИФ-200 (FTA-200); РИФ-абс; РИФц – реакция иммунофлюоресценции с цельной кровью или спинномозговой жидкостью.
Реакцию пассивной гемагглютинации – РПГА.
– ИФА.
Иммуноблотинг.

Нетрепонемные тесты

Нетрепонемные тесты на сифилис используются в качестве отборочных и не подходят для окончательной диагностики, выставления диагноза. Они активно применяются для обследования больших групп населения с целью профилактических осмотров при возникновении неблагоприятной эпидемиологической ситуации. Тест обладает простотой проведения, имеет высокую чувствительность. Результат диагностики оценивается врачом. Чувствительность неспецифических тестов при ранних формах заболевания составляет около 70 %, а при вторичном сифилисе – 100 %.

К нетрепонемным тестам диагностики сифилиса относятся:

RPR (RapidPlasmaReagins).
Тест с инактивированной сывороткой – МРП (микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном).

Данные флокуляционные тесты характеризуются простотой оценки. В ходе реакции образуется комплекс «антиген + антитело», который формирует хлопья, различимые с помощью увеличительного стекла. Роль антигена в тесте выполняет кардиолипиновый антиген, который получают из сердечной мышцы быка. Связь с антигенами возбудителя сифилиса при этом отсутствует, поэтому тесты и получили название нетрепонемные.

Экспресс-диагностика сифилиса

Современные методы диагностики сифилиса предполагают выявление заболевания на ранних стадиях. В качестве метода экспресс-диагностики используется RapidPlasmaReagin(RPR). Тест направлен на определение концентрации в крови антител к возбудителю сифилиса. При заражении бледная трепонема в организме формирует защитные антитела IgG и IgM. Наличие их в образце забранной крови является косвенным доказательством присутствия в организме бледной трепонемы. Данная диагностика сифилиса помогает установить точный срок продолжительности заболевания, время инфицирования.

Анализы на сифилис – расшифровка

Современная лабораторная диагностика сифилиса основывается следующих методах:

нетрепонемный тест – RPR или VDRL;
трепонемные тесты – РИФ и РПГА.

В странах СНГ для диагностики сифилиса чаще применяют реакцию Вассермана, также реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ. Оценку полученных результатов производит только врач, который учитывает клинические проявления заболевания, стадию патологии, состояние пациента. С примерными результатами исследований можно ознакомиться в таблице ниже.ото

Дифференциальная диагностика сифилиса

Когда у врача после первичного осмотра возникает подозрение на сифилис, он направляет пациента для сдачи крови на RV. Если результаты исследования подтвердили наличие бледной трепонемы в организме, проводится дифференциальная диагностика с определением стадии заболевания. При первичном сифилисе чаще бывают положительными РИФ и ИФА, однако это не позволяет выставить диагноз «сифилис».

Диагностика вторичного сифилиса не вызывает затруднений – резким положительным является результат по всем серологическим реакциям. РИБТ положительна больше чем у 50 % больных. Третичная форма сифилиса практически не вызывает затруднений. Серологические реакции положительные в 50–90 % случаев. Диагностика скрытого серопозитивного сифилиса основывается на серологических реакциях с подтверждением результата с помощью РИБТ.

Российский национально исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова

Кафедра дерматовенерологии педиатрического факультета

Доклад на тему: Лабораторные методы диагностики сифилиса

Выполнил: Студент 440 в группы

Педиатрического факультета

Серанов Игорь Анатольевич

Нетрепонемные исследования

Трепонемные исследования

Комплекс проведения серологических реакций

Реакция Вассермана

Реакция иммунофлюоресценции

Реакция имунного прилипания

Реакция иммобилизации бледных трепонем

Реакция иммунофлюоресценцией адсорбцией бледных трепонем

Реакция гемагглютинационная

Иммуноферментный анализ

Полимеразная цепная реакция

Все серологические методы исследования, которые применяются на сегодня, условно разделяются на два вида: нетрепонемные , отборочные (НТТ)- и трепонемные , которые подтверждают наличие возбудителя (ТТ).Сифилис протекает очень сложно, клиника очень смазана и не всегда проявляется, поэтому для постановления правильного диагноза используют сразу несколько серологических тестов. При визуалированном подтверждении присутствия во взятом материале бледной трепонемы (при помощи микроскопа) диагноз ставится сразу же, и остальные тесты проводятся редко.

Нетрепонемные исследования (тесты) - НТТ - это так называемые отборочные исследования, они не очень дорого стоят и при их помощи можно обследовать достаточно большое число пациентов, к тому же результаты при многих тестах готовы очень быстро. Но при ложном течении заболевания, при низкой чувствительности проведение таких тестов нецелесообразно, 100%-ный результат получить не удастся.

При проведении нетрепонемных тестов в материале, который исследуется, обнаруживаются антитела, которые реагируют с кардиолипин - лецитиновым антигеном . Одним из первых тестов был метод, основанный на иммунологической реакции Борде - Жангу, где в качестве антигена выступал экстракт печени новорожденного ребёнка, который умер от сифилиса. На сегодня при проведении таких тестов антигеном выступают лецитин, холестерин и кардиолипин .

За границей, в частности в США используют 4 нетрепонемных метода, которые делятся на два вида: методы, которые позволяют визуально определить результаты реакции (RPR и TRUST) и методы микроскопического считывания результатов(USR и VDRL).

К нетрепонемным методам диагностики относится непрямой иммуноферментный анализ с использованием кардиолипина в качестве антигена. У нас в стране и в странах СНГ в качестве нетрепонемных тестов выступают реакция плазмы с инактивированной сывороткой (МР) и реакция, при которой происходит связывание комплимента с кардиолипином (РСК) .

Все методы нетрепонемной диагностики очень похожи друг с другом. У них у всех невысокая стоимость, их просто и быстро провести. Эти виды тестов не подходят при выявлении заболевания на первичной стадии и при сифилисе, который протекает скрытно (латентная форма сифилиса). Антитела, которые определяются нетрепонемным тестом появляются, где то через месяц после инфицирования трепонемой. В большинстве случаев у больных, которые лечили первичную стадию сифилиса, примерно около года нетрепонемные тесты имеют отрицательный результат.

Трепонемные исследования (тесты) - ТТ стоят намного дороже, техника проведения их очень сложная и они используются для подтверждения положительных результатов, которые были получены при нетрепонемных исследованиях.

Как мы говорили выше трепонемные методы применяют для того, чтобы подтвердить наличие бледной трепонемы в организме, которое было выявлено при помощи нетрепонемных тестов. Так же их проводят, если проводимые анализы так и не дали положительного результата, но клиника предполагает наличие заболевания. После полного излечения сифилиса более чем у 80% вылечившихся наблюдается положительная реакция при проведении трепонемных тестов ещё несколько лет, а у некоторых - всю жизнь. Исходя из этого трепонемные тесты не используют для профилактических осмотров у людей, которые прошли полный курс лечения.

Научные исследования в области иммунологии и молекулярной биологии продолжаются постоянно и при помощи новейших технологий появляются всё новые тесты для диагностики сифилиса, которые прочно занимают лидирующие позиции. Один из таких тестов, который прочно вошёл в практику - иммуноферментный анализ (ИФА) , а многие исследовательские методы находятся на стадиях разработки.

Тот комплекс проведения серологических исследований , который проводят в России включает в себя комплексное проведение серологических реакций:

стандартных серологических реакций –

реакцию связывания комплемента(реакция Вассермана),

реакцию с трепонемным антигеном и реакцию с кардиолипином;

груповых трепонемных реакций-

реакцию иммунофлюоресценции (РИФ)

реакцию иммунного прилипания(РИП);

видоспецифических протеиновых трепонемных реакций –

реакцию иммобилизации трепонем(РИТ),

РИФ - абс и её варианты (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS),

реакцию пассивной гемаглюцинации трепонем(РПГА).

Если серологические реакции использовать в комплексе, это даст возможность выявить заболевание на ранних этапах заболевания.

Реакция Вассермана - это метод связывания комплемента. Для проведения реакции в качестве антигена используют экстракты, которые изготавливаются из бледных трепонем (специфические антигены) и кардиолипин - это экстракт приготовленный из сердечной мышцы быка(неспецифические антигены). Чем больше в исследуемом материале наблюдается бледных трепонем, тем больше степень заболевания и оценивают степень плюсами:

1) - отрицательная; 2) + сомнительная; 3) ++ слабоположительная; 4) +++ положительная; 5) ++++ резкоположительная.

Реакцию Вассермана (Реакция связывания комплемента) в обязательном порядке проводят вместе с осадочными реакциями – Закс - Витебского и Кана. Иммунологическая природа реакций, в общем- то такая же, как и у реакции Вассермана, но для этих реакций требуются более насыщенные антигены, которые при вступлении в реакцию с реагинами сыворотки дают больший осадок. Серонегативный первичный сифилис ставят, если стандартные серологические реакции дали отрицательный результат. Выявление сифилиса реакцией Вассермана эффективно при серопозитивном вторичном сифилисе, здесь результаты теста на 100% верны . На третичной стадии активного сифилиса результаты верны у более половины больных, а на последних стадиях сифилиса, при поражении внутренних органов и систем, результаты верны у половины больных. У больных ранним врождённым сифилисом серологические реакции дают положительный результат почти всегда , а у больных с поздним врождённым сифилисом - почти в 80% случаев.

Принцип РСК заключается в том, что реагины, находящиеся в сыворотке крови больных сифилисом, обладают свойством вступать в соединения с различными антигенами. Образовавшиеся комплексы сортируют введенный в реакцию комплемент. Для индикации комплекса реагины–антиген–комплемент используется гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой). При наличии комплекса эритроциты выпадают в осадок. Что заметно не вооруженынм глазом. Выраженность гемолиза обозначается врачом ключами: резко положительная 4+, положительная 3+, слабоположительная 2+ ли 1+ и отрицательная. Кроме качественной оценки этих реакций имеется и количественная, имеющая значение в диагностике некоторых стадий сифилиса и при контроле за эффективностью терапии

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ) основана на выявлении антител, которые метят специальным флуоресцентным раствором, для того, чтобы в фиолетовых лучах кварцевой лампы выявить соединённые с антигеном антитела. Эта реакция имеет высокую чувствительность и помогает выявить заболевание на первичной стадии серонегативного сифилиса. Так же именно этот тест помогает выявить заболевание у пациентов, у которых заболевание протекает латентно или на поздних стадиях. Существует несколько типов таких реакций и наиболее высоко ценится РИФ-200, при помощи, которой можно выявлять скрытый сифилис и распознать неспецифические результаты КСР. Но, несмотря на высокие показатели РИФа-200, постановка диагноза происходит после проведения всех клинических анализов. РИФ не подходит для наблюдения за пациентами после проведения полного лечения , так как достаточно медленно негативируется на этапе проведения лечения.

Реакция иммуного прилипания (РИП) . В основе этой реакции лежит прилипание трепонем, которые сенсибилизированны сывороткой, к эритроцитам и выпадение их в осадок. Результаты оцениваются по следующей таблице:

Отрицательная- 0-20%

Сомнительная-21-30%;

Слабоположительная-31-50%;

Положительная-51-100%.

По всем показателям РИП очень похожа на РИФ и РИТ. Эта реакция проводится в нескольких случаях, если на основании клинических проявлений, анамнеза, лабораторных исследований сифилис не подтверждается, для контроля за заболеванием после получения необходимого лечения и для подтверждения результатов КСР.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ) .Попав в среду, где есть иммобилизины испытуемой сыворотки и активный комплемент, бледные трепонемы теряют подвижность. На этом и основывается эта реакция. РИТ очень специфична и применяется для распознания скрытого сифилиса, для диагностики беременных, у которых подозревают сифилис и многих других случаев, при которых стандартные серологические тесты мало специфичны. Большой недостаток этой реакции то, что она стоит очень дорого и её проведение - очень сложный процесс. Результаты считываются по процентным данным иммобилизации бледных трепонем:

Отрицательная - до 20%; -сомнительная -21-30%; -слабоположительная -31-50%; -положительная -51-100%.

В связи с тем, что иммобилизины появляются в крови позже других антител, реакция становится положительной немного позже, чем при проведении других реакций. На первичном этапе инфицирования, как правило, наблюдается отрицательная или слабоположительная реакция. На вторичном этапе сифилиса, хотя появление иммобилизинов в сыворотке крови у больного наблюдается до 60%, реакция положительна почти у половины исследуемых. При рецидиве вторичной стадии сифилиса РИТ положительна почти у 90% больных. На третичной стадии развития сифилиса, при поражении внутренних органов, в том числе и нервной системы, когда реакция Вассермана даёт отрицательные результаты, реакция иммобилизации бледных трепонем положительна почти у 100% больных. На раннем этапе врождённого сифилиса реакция имеет положительный результат почти у всех больных, а на позднем этапе врождённого сифилиса - почти у 100% больных. Серопозитивный латентный сифилис подтверждается только после проведения РИТ, которую проводят после получения положительных результатов при проведении других серологических реакций. РИТ не применяют для контроля за заболеванием у больных , которые получили необходимое лечение.

Реакция иммунофлуоресценции абсорбции с бледной трепонемой (FTA-ABS) .Если реакцию проводят для больного, который болен сифилисом и не лечился, то тогда эта реакция даёт положительный результат всегда. Так же высока вероятность выявить инфекцию при помощи FTA-ABS в самом начале заболевания . Реакция обладает большой чувствительностью и специфичностью. Для диагностики латентного сифилиса и в тех случаях, когда уже было проведено несколько тестов и они показали отрицательный результат, но клиника говорит о инфицировании бледной трепонемой, в таких случаях диагноз ставят часто опираясь на результаты FTA-ABS. Буквально через неделю после того, как бледная трепонема попала в организм, начинают вырабатываться специфические антитела IgM, которые со временем перестают появляться и через 2 года уже не определяются. Для того, чтобы понять даёт ли предложенное лечение эффект, проводят специальные тесты, которые определяют специфичность этих антител. Таких тестов на сегодня есть несколько, но проведение их слишком дорого, поэтому для большинства больных эти тесты не проводят.

Гемагглютинационная реакция , которая определяет специфические антитела к бледной трепонеме (микро-РПГА). Для этой реакции в качестве антигена служат трепонемы, поэтому эта реакция очень специфична и даёт правдивые результаты в большинстве случаев.

Иммуноферментный анализ (ИФА) один из наиболее специфичных для диагностики сифилиса. На сегодня чаще всего используют непрямой вариант ИФА. Преимущества этого метода исследования очевидны: не слишком большая стоимость, лёгкость проведения, достаточна высокая точность результата, при помощи этого анализа можно выявить сифилис на ранней стадии, быстрое получение результатов.

В основе метода иммуноблотинга лежит иммуноферментный анализ, который сочетается с электрофорезом. Является одним из самых специфичных анализов и при его помощи происходит подтверждение инфицирования сифилисом.

Полимеразную цепную реакцию (специфический метод исследования) проводят для установления диагноза при скрытых течениях сифилисной инфекции. При проведении ПЦР в испытуемом материале находят возбудителя, даже на первичном этапе заболевания. Обнаруживаемый генетический материал при помощи ДНК делится и таким образом обнаружить возбудителя становится очень просто. При нейросифилисе, когда выявить инфекцию бывает очень затруднительно при проведении других анализов из-за очень низкой чувствительности, при врождённом сифилисе, при первичной стадии серонегативного сифилиса и для постановки диагноза у ВИЧ-инфицированных проведение ПЦР незаменимо. Исследование спинномозговой жидкости при сифилисе проводят, если есть клинические поражения нервной системы на ранней стадии заболевания, при скрытой форме и обязательно ещё до начала лечения. Так же этот анализ назначается для больных нейросифилисом на поздних стадиях сифилиса и при латентной форме. В клинической лаборатории проводят исследование цитоза, содержание белка, реакции Панди и Нонне - Апельта. В серологических лабораториях проводится реакция Вассермана, реакция Ланге, РИФ, РИФю,РИФц, РИТ.

Диагностика сифилиса включает в себя:

Изучение анамнеза жизни и заболевания.
Клинический осмотр пациента.
Исследование материала с пораженных участков (лимфатические узлы, ликвор, амниотическая жидкость) на предмет обнаружения бледной трепонемы.
Проведение серодиагностики (нетрепонемные и трепонемные тесты).
Проведение дополнительных лабораторных исследований (общий анализ крови и мочи, биохимия крови и др.).

Нетрепонемные тесты позволяют обнаружить в сыворотке крови антитела к фосфолипидам, которые разрушаются вследствие данного заболевания.

К нетрепонемным тестам относятся:

Антикардиолипиновый тест (тест быстрых плазменных реагинов, RPR, экспресс-тест на сифилис).
Реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (реакция Вассермана).
Микроскопический тест.

Реакцию Вассермана можно проводить также с трепонемным антигеном. Поэтому в зависимости от того, какой материал используется в реакции, данное исследование можно отнести, как к трепонемным, так и к нетрепонемным.

Описание и принцип действия антикардиолипинового теста (RPR).

Возбудителем сифилиса является Treponema palidum. Данный возбудитель имеет несколько чужеродных для организма человека антигенов, которые по строению аналогичны кардиолипину. Иммунная система пациента реагирует на кардиолипиновые антигены выработкой специфических антител класса IgG и IgM.

Данный экспресс-тест на сифилис относится к числу нетрепонемных. Исследование позволяет выявить антифосфолипидные антитела в крови больных первичным сифилисом в 75% случаях. На стадии вторичного сифилиса результат анализа положительный в 100% обследованных. Наиболее эффективным принято считать проведение теста спустя неделю после образования сифилитической язвы или через 3- 5 недель после заражения.

Проведение данного метода диагностики актуально для скрининга при беременности и для обследования полового партнера. Также, тест используют для оценки эффективности назначенного лечения. После адекватно проведенной терапии результат антикардиолипинового теста становится отрицательным.

В связи с тем, что тест относится к ряду неспецифических возможно развитие ложноположительного результата. Это обусловлено тем, что данные антитела могут быть выявлены при ряде других инфекций, вызванных бледной трепонемой.

При условии, если результат данного метода диагностики показал положительные результаты, то рекомендуется проконсультироваться с врачом (дерматовенерологом) и провести повторное исследование, используя специфический трепонемный тест.

Исследование следует проводить натощак. Пациента ставят в известность, что на протяжении 8 часов до проведения анализа противопоказано употреблять продукты питания. С утра можно выпить стакан воды.

Обратите внимание

На сегодняшний день сдать анализы на сифилис можно в медицинских учреждениях как государственного, так и частного типа. Исследования на сифилис в лабораториях любого типа должны проводиться анонимно.

Для экспресс теста на сифилис используют антиген, в состав которого входит кардиолипин, лецитин и холестерин, а также кровь пациента. Для лучшей визуализации результата исследования используют частицы угля. При положительном результате в сыворотке образуются черного цвета флокулянты.

При титре от 1:2 до 1:320 и выше результат экспресс-теста для подтверждения диагноз сифилис принято считать положительным.

Отрицательным считают результат при полном отсутствии антител. Сомнительная реакция - низкие титры антител.

Также, в аптеке можно купить набор теста на сифилис для использования в домашних условиях.

Анализ крови РПГА: подготовка к сдаче и анализ полученных результатов

Более достоверными тестами для диагностики заболевания принято считать исследования, при помощи которых можно обнаружить специфические антигены возбудителя заболевания или комплексы антиген-антитело.

К числу таких трепонемных тестов относятся:

Реакция иммунофлюресценции (РИФ).
Реакция пассивной агглютинации (РПГА).
Иммуноферментный анализ (ИФА).
Реакция иммобилизации Treponema palidum.
Иммуноблодинг.

Что такое анализ крови РПГА?

При помощи данного исследования удается выявить агглютинацию тех эритроцитов, на поверхности которых были зафиксированы антигены возбудителя сифилиса. Анализ следует проводить в комплексе с тестом быстрых плазменных реагинов.

Это обусловлено тем, что при одиночном проведении анализа крови на сифилис методом РПГА возможно развитие отрицательного результата исследования в первые 4 недели после заражения, при первичном сифилисе и при скрытом течении заболевания.

Подготовка пациента к сдаче анализа:

Исследование показано проводить натощак.
Следует ограничить прием жидкости (вечером и утром можно выпить по стакану простой воды).
Анализ рекомендовано сдавать впервой половине дня.
На протяжении 30 минут строго противопоказано курить.
Недопустимо содержание в крови алкоголя.

В случае не соблюдения всех вышеуказанных рекомендаций возрастает риск развития ложноположительных результатов.

На сегодняшний день, данный метод исследования постепенно вытесняют более современные и высокочувствительные (экспресс методы, РПГА и т. д.). Но, тем не менее, в странах СНГ его еще используют в качестве скринингового исследования.

Расшифровка данных анализа крови на RW:

«-» - результат отрицательный.
«+/-» - сомнительный.
«++» - слабоположительный.
«+++» - положительный.
«++++» - резко положительный.

В случае резко положительного результата исследования титр составляет от 1:2 до 1:800.

При первичном сифилисе исследуется на бледную трепонему отделяемое твердого шанкра или пунктат лимфатических узлов. При вторичном сифилисе материал берется с поверхности эрозированных папул на коже, слизистых, с трещин и др. Перед взятием материала с целью очищения от различных загрязнений поверхность очагов (эрозии, язвы, трещины) необходимо тщательно протереть стерильным ватно-марлевым тампоном, который смачивается изотоническим раствором хлорида натрия или назначить примочки с этим же раствором. Очищенную поверхность осушивают сухим тампоном и платиновой петлей или лопаточкой слегка раздражают периферические участки, одновременно слегка сдавливая пальцами в резиновой перчатке основание элемента до появления тканевой жидкости (серума), из которой готовят препарат для исследования. Получение тканевой жидкости имеет важное значение для диагностики сифилиса, так как бледные трепонемы находятся в просветах лимфатических капилляров, в тканевых щелях вокруг лимфатических и кровеносных сосудов.

Пункция регионарных лимфатических узлов

Кожу над лимфатическими узлами обрабатывают 96% спиртом и 3-5% спиртовым раствором йода. Затем 1 и 2 пальцами левой кисти фиксируют лимфатический узел. Правой рукой берут стерильный шприц с несколькими каплями изотонического раствора хлорида натрия, который вкалывается параллельно продольной оси лимфатического узла. Игла проталкивается в разных направлениях до противоположной стенки капсулы узла и содержимое шприца медленно вводится. Пальцами левой кисти лимфатический узел слегка массируется. При медленном извлечении иглы одновременно выдвигают поршень шприца, аспирируя содержимое лимфатического узла. Материал наносится на предметное стекло (при малом количестве материала добавляется капля изотонического раствора хлорида натрия), покрывается покровным стеклом. Исследование нативного препарата проводится в темном поле зрения при помощи светооптического микроскопа с темнопольным конденсором (объектив 40, 7х, 10х или 15х). Бледные трепонемы могут обнаруживаться также в окрашенных препаратах. При окраске по Романовскому-Гимзе бледные трепонемы окрашиваются в розовый цвет, по Фонтану и Морозову в коричневый (черный), по методу Бурри неокрашенные трепонемы выявляются на темном фоне.

Серологическая диагностика

Важное значение в диагностике сифилиса, оценке эффективности лечения, установлении критерия излеченности, выявления скрытых, резистентных форм придается стандартным (классическим) и специфическим серологическим реакциям. К стандартным или классическим серологическим реакциям (КСР) относятся:

Реакция Вассермана (РВ),
осадочные реакции Кана и Закса-Витебского (цитохолевая),
реакция на стекле (экспресс-метод),

к специфическим:

реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ),
реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Реакция Вассермана (РВ)

- разработана А.Вассерманом (A.Wasserman) совместно с А.Нейссером (A.Neisser) и Ц.Бруком (C.Bruck) в 1906 году. Реакции Вассермана основана на феномене связывания комплемента (реакция Борде-Жангу) и позволяет определять противолипидные антитела (реагины). Согласно современным представлениям, в реакции Вассермана определяются антитела к липидам макроорганизма, а не бледной трепонемы и реакция выявляет аутоиммунный процесс, который вызывается денатурированием бледными трепонемами тканей макроорганизма с образованием липопротеидного комплекса (конъюгата), в котором липиды (гаптены) являются детерминантой.

Обычно РВ ставится с двумя или тремя антигенами. Наиболее часто применяется отличающийся высокой чувствительностью кардиолипиновый антиген (экстракт из сердца быка, обогащенный холестерином и лецитином) и трепонемный антиген (обработанная ультразвуком взвесь анатогенных культуральных бледных трепонем). Совместно с реагинами сыворотки крови больного эти антигены образуют иммунный комплекс, способный адсорбировать и связывать комплемент. Для визуального определения образованного комплекса (реагины + антиген + комплемент) в качестве индикатора применяется гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой). Если комплемент связан в 1 фазе реакции (реагины + антиген + комплемент), гемолиз не наступает - эритроциты выпадают в легко заметный осадок (РВ положительная). Если в 1 фазе комплемент не связан вследствие отсутствия в испытуемой сыворотке реагинов, он будет использован гемолитической системой и произойдет гемолиз (РВ отрицательная). Степень выраженности гемолиза при постановке РВ оценивается плюсами: полное отсутствие гемолиза ++++ или 4+ (РВ резкоположительная); едва начавшийся гемолиз +++ или 3+ (РВ положительная); значительный гемолиз ++ или 2+ (РВ слабоположительная); непонятная картина гемолиза ± (РВ сомнительная); полный гемолиз - (реакция Вассермана отрицательная).

Помимо качественной оценки РВ имеется количественная постановка с различными разведениями сыворотки (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320). Титр реагинов определяется максимальным разведением, еще дающим резко положительный (4+) результат. Количественная постановка РВ имеет значение в диагностике некоторых клинических форм сифилитической инфекции, а также при проведении контроля за эффективностью лечения. В настоящее время реакция Вассермана ставится с двумя антигенами (кардиолипиновый и трепонемный озвученный штамм Рейтера). Как правило, РВ становится положительной на 5-6 неделе после заражения у 25-60% больных, на 7-8 неделе - у 75-96%, на 9-19 неделе - у 100%, хотя в последние годы иногда раньше или позже. При этом, титр реагинов постепенно нарастает и достигает максимальной величины (1:160-1:320 и выше) в случае появления генерализованных высыпаний (сифилис вторичный свежий). При позитивации РВ выставляется диагноз первичного серопозитивного сифилиса.
При вторичном свежем и вторичном рецидивном сифилисе РВ положительная у 100% больных, но у истощенных больных с ослабленным иммунитетом может наблюдаться отрицательный результат. Впоследствии титр реагинов постепенно понижается и при вторичном рецидивном сифилисе обычно не превышает 1:80-1:120.
При третичном сифилисе РВ положительная у 65-70% больных и обычно наблюдается низкий титр реагинов (1:20-1:40). При поздних формах сифилиса (сифилис внутренних органов, нервной системы) положительная РВ наблюдается в 50-80% случаев. Титр реагинов колеблется от 1:5 до 1:320.
При скрытом сифилисе положительная РВ отмечается у 100% больных. Титр реагинов от 1:80 до 1:640, а при позднем скрытом сифилисе от 1:10 до 1:20. Быстрое снижение титра реагинов (вплоть до полной негативации) во время лечения свидетельствует об эффективности лечения.

Недостатки реакции Вассермана - недостаточная чувствительность (в начальной стадии первичного сифилиса отрицательная). Она негативная также у 1/3 больных, если они в прошлом лечились антибиотиками, у пациентов третичным активным сифилисом с поражениями кожи и слизистых, костно-суставного аппарата, внутренних органов, центральной нервной системы, при позднем врожденном сифилисе.
Недостаточная специфичность - реакция Вассермана может быть положительная у лиц, которые ранее не болели и не болеют сифилисом. В частности ложноположительные (неспецифические) результаты РВ отмечаются у больных, которые страдают системной красной волчанкой, лепрой, малярией, злокачественными новообразованиями, поражениями печени, обширными инфарктами миокарда и другими заболеваниями, а иногда у совершенно здоровых людей.
Кратковременная ложноположительная реакция Вассермана выявляется у некоторых женщин перед родами или после них, у лиц, злоупотребляющих наркотиками, после наркоза, приема алкоголя. Как правило, ложноположительная РВ выражена слабо, чаще с низким титром реагинов (1:5-1:20), положительная (3+) или слабо положительная (2+). При массовых серологических обследованиях частота ложноположительных результатов составляет 0,1-0,15%. Для преодоления недостаточной чувствительности, пользуются постановкой на холоде (реакция Колляра) и одновременно она ставится с другими серологическими реакциями.

Осадочные реакции Кана и Закса-Витебского

Реакция Вассермана применяется в комплексе с двумя осадочными реакциями (Кана и Закса-Витебского ), при постановке которых готовятся более концентрированные антигены. Экспресс метод (микрореакция на стекле) - относится к липидным реакциям и основан на реакции преципитации. Ставится со специфическим кардиолипиновым антигеном, 1 каплю которого смешивают с 2-3 каплями исследуемой сыворотки крови в лунках специальной стеклянной пластины.
Преимущество - быстрота получения ответа (через 30-40 мин). Результаты оцениваются по количеству выпавшего осадка и величины хлопьев. Выраженность определяют как КСР - 4+, 3+, 2+ и отрицательная. Следует отметить, что ложноположительные результаты наблюдаются чаще, чем при РВ. Как правило, экспресс-метод применяется при массовых обследованиях на сифилис, при обследовании в клинико-диагностических лабораториях, соматических отделениях и больницах. На основании результатов экспресс-метода диагноз сифилиса выставлять запрещается, исключается его применение у беременных, доноров, а также для контроля после лечения.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ) - предложена в 1949 году Р.Нельсоном (R.W.Nelson) и М.Мейером (M.Mayer). Является наиболее специфичным диагностическим тестом на сифилис. Однако сложность и дороговизна постановки ограничивает ее применение. В сыворотке крови больных производится определение видеоспецифичных антител (иммобилизинов), которые приводят к неподвижности бледных трепонем в присутствии комплемента. Антигеном являются живые патогенные бледные трепонемы, выделяемые от зараженных сифилисом кроликов. С помощью микроскопа проводится посчет утративших подвижность (иммобилизованных) бледных трепонем и оцениваются результаты РИБТ: иммобилизация бледных трепонем от 51 до 100% - положительная; от 31 до 50% - слабо положительная; от 21 до 30% - сомнительная; от 0 до 20% - отрицательная.
РИБТ имеет значение при дифференциальной диагностике для отграничения ложноположительных серологических реакций от реакций, обусловленных сифилисом. Поздно становится положительной чем РВ, РИФ и поэтому для диагностики заразных форм сифилиса ее не применяют , хотя во вторичном периоде сифилиса она положительная у 85-100% больных.
В третичном периоде сифилиса с поражением внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы РИБТ положительная в 98-100% случаев (РВ часто отрицательная ).
Необходимо помнить, что РИБТ может оказаться ложноположительной в случае наличия в исследуемой сыворотке трепонемоцидных препаратов (пенициллин, тетрациклин, макролиты и др.), которые вызывают неспецифическую иммобилизацию бледных трепонем. С этой целью кровь на РИБТ исследуется не ранее 2 недель после окончания приема антибиотиков и других лекарственных средств.
РИБТ как и РИФ в процессе лечения медленно негативируются, поэтому она не применяется в качестве контроля в процессе лечения.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) - разработана в 1954 году A.Coons и впервые применена для диагностики сифилитической инфекции Deacon, Falcone, Harris в 1957 году. РИФ основана на непрямом методе определения флюоресцирующих антител. Антигеном для постановки являются фиксированные на предметных стеклах тканевые патогенные бледные трепонемы, на которые наносят исследуемую сыворотку. Если в исследуемой сыворотке имеются противотрепонемные антитела, относящиеся к IgM и IgG, они прочно связываются с антигеном - трепонемами, что выявляется в люминесцентном микроскопе с помощью антивидовой ("противочеловеческой") флюоресцирующей сыворотки.
Результаты РИФ учитываются по интенсивности свечения бледных трепонем в препарате (желто-зеленое свечение). При отсутствии противотрепонемных антител в сыворотке, бледные трепонемы не определяются. При наличии антител выявляется свечение бледных трепонем, степень которого выражается в плюсах: 0 и 1+ - отрицательная реакция; от 2+ до 4+ - положительная.
РИФ относится к групповым трепонемным реакциям и ставится в разведении исследуемой сыворотки в 10 и 200 раз (РИФ-10 и РИФ-200). РИФ-10 считается более чувствительной, однако часто выпадают неспецифические положительные результаты, чем при постановке РИФ-200 (отличается более высокой специфичностью). Как правило, РИФ становится положительной раньше, чем РВ - положительная при первичном серонегативном сифилисе у 80% больных, у 100% во вторичном периоде сифилиса, всегда положительная при скрытом сифилисе и в 95-100% случаев при поздних формах и врожденном сифилисе.
Специфичность РИФ повышается после предварительной обработки исследуемой сыворотки сорбентом-ультраозвученным трепонемным антигеном, который связывает групповые антитела (РИФ - абс).
Показания к постановке РИБТ и РИФ - диагностика скрытого сифилиса для подтверждения специфичности комплекса липидных реакций в случае предположения сифилитической инфекции на основании положительной РВ. Положительные РИБТ и РИФ являются доказательством латентного сифилиса. При ложноположительной РВ при различных болезнях (системная красная волчанка, злокачественные новообразования и др.) и если повторные результаты РИБТ и РИФ отрицательные, это свидетельствует о неспецифическом характере РВ. Подозрение на поздние сифилитические поражения внутренних органов, опорно-двигательного аппарата, нервной системы при наличии у больных отрицательной РВ. Подозрение на первичный серонегативный сифилис, когда у пациентов при многократных исследованиях отделяемого с поверхности эрозии (язвы), при пунктате из увеличенных регионарных лимфатических узлов бледная трепонема не обнаруживается - в этом случае ставится только РИФ - 10.
При обследовании лиц с отрицательной РВ , которые имели длительные половые и бытовые контакты с больными сифилисом, учитывая вероятную возможность лечения их в недавнем прошлом противосифилитическими препаратами, вызвавшими негативацию РВ. Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA - enzymelinked immunosorbent assay) - метод разработан E.Engvall и соавт., S.Avrames (1971). Сущность состоит в соединении сифилитического антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя с антителом исследуемой сыворотки крови и выявлении специфического комплекса антиген-антитело при помощи меченной ферментом антивидовой иммунной сыворотки крови. Это позволяет оценивать результаты ИФА визуально по степени изменения окраски субстрата под действием фермента, входящего в состав конъюгата. Недостоверные результаты ИФА могут возникать в результате недостаточного разведения инградиентов, нарушения температурного и временного режимов, несоответствии рН растворов, загрязнении лабораторной посуды, неправильной технике промывки носителя.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Предложена в качестве диагностического теста на сифилис T.Rathlev (1965,1967), T.Tomizawa (1966). Макромодификация реакции называется ТРНА, микромодификация - МНА-ТР, автоматизированный вариант - AMNA-TR, реакция с макрокапсулами из полимочевины вместо эритроцитов - МСА-ТР. Чувствительность и специфичность РПГА аналогичны РИБТ, РИФ, но РПГА имеет меньшую чувствительность при ранних формах сифилиса по сравнению с РИФ-абс и большую при поздних, при врожденном сифилисе. РПГА ставится в качественном и количественном вариантах.

Техника взятия крови для серологических реакций

Для исследования на РВ, РИФ, РИБТ кровь берут из локтевой вены натощак или не раньше 4 час после приема пищи стерильным шприцом или одной иглой (самотеком). В месте взятия кожу предварительно обрабатывают 70% спиртом. Шприц и игла должны быть промыты изотоническим раствором хлорида натрия. В чистую сухую холодную пробирку вливают 5-7 мл исследуемой крови. На пробирку клеится чистая бумага с фамилией, инициалами пациента, номером истории болезни или амбулаторной карты, датой взятия крови. После взятия крови пробирка помещается в холодильник с температурным режимом +4°+8°С до следующего дня. На следующий день сыворотка сливается для исследования. В случае не использования крови на следующий день, сыворотку необходимо слить со сгустка и хранить в холодильнике не более 1 недели. Для исследования на РИБТ пробирка должна быть специально подготовлена и стерильна. В случае нарушения правил забора крови на исследование, несоблюдение условий может произойти искажение результатов.
Не рекомендуется производить забор крови для исследования после приема пищи, алкоголя, различных медикаментозных препаратов, после введения различных вакцин, во время менструального цикла у женщин.
Для исследования на экспресс-метод кровь берегся из кончика пальца, как это делается при ее взятии на СОЭ, но берут кровь на 1 капилляр больше. Экспресс-метод можно также ставить с сывороткой крови, полученной при помощи венопункции. Если возникает необходимость исследования крови в отдаленных лабораториях, вместо крови можно пересылать сухую сыворотку (метод сухой капли). Для этого на следующий день после взятия крови, сыворотку отделяют от сгустка и набирают в стерильный шприц в количестве 1 мл. Затем сыворотку выливают в виде 2 отдельных кружков на полоску плотной писчей бумаги (вощаная бумага или целлофан) размером 6x8 см. На свободном крае бумаги пишется фамилия, инициалы обследуемого и дата забора крови. Бумагу с сывороткой защищают от прямых солнечных лучей и оставляют при комнатной температуре до следующего дня. Сыворотка засыхает в виде небольших кружочков блестящей желтоватой стекловидной пленки. После этого, полоски бумаги с высушенной сывороткой свертывают как аптечный порошок и отсылают в лабораторию, указывая диагноз и с какой целью исследуется.

Серологическая резистентность

У части (2% и более) больных сифилисом, несмотря на проведенную полноценную противосифилитическую терапию, наблюдается замедление (отсутствие) негативации серологических реакций после окончания лечения до 12 мес и более. Возникает так называемая серологическая резистентность, которая в последние годы стала часто наблюдаться. Различают формы серологической резистентности:

Истинная (абсолютная, безусловная) - необходимо провести дополнительное противосифилитическое лечение, комбинируя с неспецифической терапией для повышения иммунных сил организма.
Относительная - после полноценного лечения бледные трепонемы образуют цист- или L-формы, которые находятся в организме в маловирулентном состоянии и вследствие этого дополнительное лечение не изменяет показатели серологических реакций, особенно РИФ и РИБТ.

В то же время в цист-формах происходят незначительные обменные процессы, а оболочки цист-форм являются чужеродным белком (антигеном). Для своей защиты организм вырабатывает специфические антнтела, которые положительны или резко положительны при постановке серологических реакций, отсутствии проявлений заболевания. При L-формах обменные процессы более снижены и антигенные свойства отсутствуют или незначительно выражены. Специфические антитела не вырабатываются или они в небольшом количестве, серологические реакции слабо положительные или отрицательные. Чем больший период времени от момента заражения, тем большее количество бледных трепонем трансформируется в формы выживания (цисты, споры, L-формы, зерна), при которых противосифилитическая терапия не эффективна.

Псевдорезистентность - после проведенного лечения несмотря на положительные серологические реакции бледная трепонема в организме отсутствует. Антигена в организме нет, но продолжается выработка антител, которые фиксируются при постановке серологических реакций.
Серологическая резистентность может развиваться вследствие:

неполноценного лечения без учета давности и стадии заболевания;
недостаточной дозы и в частности из-за неучета массы тела пациентов;
нарушения интервала между введением препаратов;
сохранения в организме бледных трепонем несмотря на проведенное полноценное специфическое лечение, из-за их стойкости к пенициллину и другим химиопрепаратам в случае наличия скрытых, осумкованных очагов поражения во внутренних органах, нервной системе, лимфатических узлах, которые малодоступны для антибактериальных препаратов (нередко бледные трепонемы обнаруживаются в тканях рубца через много лет после окончания терапии, в лимфатических узлах иногда удается обнаружить бледные трепонемы через 3-5 лет после противосифилитической терапии);
снижения защитных сил при различных заболеваниях и интоксикациях (эндокринопатии, алкоголизм, наркомания и др.);
общего истощения (приемом пищи бедной витаминами, белками, жирами).

Кроме этого, нередко выявляется ложная позитивация серологических реакций, не связанная с наличие у больных сифилиса и вызванная:

сопутствующими неспецифическими заболеваниями внутренних органов, нарушениями сердечнососудистой системы, ревматизмом, дисфункциями эндокринной и нервной систем, тяжелыми хроническими дерматозами, злокачественными новообразованиями;
поражениями нервной системы (тяжелые травмы, сотрясение головного мозга, психические травмы);
беременностью; хроническими интоксикациями алкоголем, никотином наркотиками; инфекционными болезнями (малярия, туберкулез, вирусный гепатит, дизентерия, сыпной, брюшной и возвратный тифы).

Указанные факторы могут оказывать влияние на иммунологическую реактивность организма как в период активного развития сифилитических проявлений, так и во время их регресса.

Сифилис — довольно опасная патология, возникновение которой провоцируется проникновением в организм бледной трепонемы (Treponema pallidum). Заболевание опасное и при несвоевременной терапии или игнорировании проявлений, чревато критическими последствиями, в том числе летальным исходом.

Терапия венерического недуга продолжительная и трудоемкая. Своевременное выявление недуга и целесообразное лечение — оптимальный способ предупреждения развития осложнений, улучшения общего состояния и самочувствия. Прогноз будет благоприятным только в случае выявления сифилиса на ранних стадиях.

Патология коварна, характеризуется медленным и прогрессирующим течением. Обнаруживается зачастую случайно при прохождении обследования при подозрении на иной недуг, и поэтому зачастую выявляется поздно.

Поздние стадии болезни чреваты необратимыми и тяжелыми поражениями не только внутренних органов и систем, но и ЦНС. Человек может на протяжении длительного периода даже не догадываться о наличии заболевания и заражать партнеров. Риск инфицирования при интимной близости с зараженным — 30-35%. Продолжительность скрытого течения составляет примерно 1,5 месяца. Симптоматика недуга разнообразна и изменяется с прогрессированием патологии.

При появлении первой тревожной симптоматики — твердого шанкра на кожных покровах, необходимо в незамедлительном порядке обратиться за помощью специалиста и пройти обследование.

Не стоит пытаться самостоятельно вылечить недуг, это чревато непредсказуемыми последствию и чаще приводит к развитию осложнений. Сегодня существует много препаратов для терапии болезни, а также методов определения наличия в организме трепонем. Диагностирование патологии заключается в изучении анамнеза жизни, осмотре пациента, сборе анализов (биологического материала) и дальнейшего исследования жидкостей, в том числе крови, проведении серодиагностики. Также проводят дополнительные лабораторные исследования мочи, крови и биохимии крови.

Самый популярный и весьма эффективный способ — экспресс-тест на сифилис. Действие теста схоже по принципу с тестом на беременность. Единственное отличие — вместо урины используется кровь.

Достоинства метода исследования

Способ выявления сифилиса и его возбудителя пользуется спросом и в отличие от остальных методик обладает рядом преимуществ.

К основным из них относят:

Быстрый результат. Практически любой экспресс тест на сифилис дает результат в течение получаса. В некоторых случаях результата придется ждать несколько часов, но это все равно быстрее, чем исследование материала в лабораториях.
Цену. Приспособление в среднем стоит 300 рублей, что в разы дешевле диагностики в условиях лаборатории.
Возможность приобрести, как в любой аптеке, так и интернет магазине (анонимно).
Возможность проведения самостоятельно, в домашних условиях.
Простоту и доступность. Для прохождения теста не нужно особых знаний и умений. Все что нужно сделать — ознакомиться с аннотацией и при прохождении теста придерживаться всех рекомендаций.
Анонимность. Для проведения исследования нет надобности в посещении медучреждения. Не нужно оставлять контактную информацию.

Показания

Провести исследование может каждый желающий.

Но чаще всего проведение экспресс-теста на сифилис рекомендовано:

во время вынашивания плода;
в случае возникновения тревожной симптоматики;
при отсутствии возможности диагностирования в медучреждении;
людям, которые часто меняют половых партнеров;
тем, кто страдает иными половыми инфекциями;
перед тем, как сдать кровь (донорство);
при близком бытовом контакте с зараженным;
людям, которые по каким-то причинам не пользуются методами контрацепции;
если был незащищенный половой контакт.

Подготовительный этап и порядок выполнения исследования

С целью получения достоверного результата, экспресс-тест на сифилис следует проводить с учетом нескольких правил.

Категорически не рекомендуется за один-два дня до исследования пить спиртные напитки.
За тридцать минут до анализа следует отказаться от курения.
Тест необходимо проводить натощак и предпочтительно до обеда.
Перед проведением необходимо тщательно изучить инструкцию.

Несоблюдение этих рекомендаций чревато искажением результата. Проводится тест очень просто. Никакими особыми навыками и умениями обладать не нужно. Для начала следует хорошо вымыть руки (желательно мылом, обладающим антибактериальными свойствами). Нельзя проводить процедуру, если тест был только что куплен, и он еще не нагрелся до комнатной температуры (зимой, к примеру). Вскрывать упаковку следует только после окончания подготовки.

Чтобы полоска, которая уже извлечена, лежала на горизонтальной и ровной поверхности. К тому же она должна быть чистая и сухая.

Перед исследованием палец протирают спиртовой салфеткой (ее внутренней стороной). После прокола верхней фаланги скарификатором, каплю крови, которая выступит, следует набрать в пипетку и выдавить в ячейку индикатора. Далее в ячейку добавляется реагент — пара капель. Приблизительно по истечении четверти часа можно узнать результат. Если результат появился на индикаторе позднее (более чем через полчаса), считать его верным не рекомендовано.

Принцип работы

Работа теста схожа по принципу с тестом для определения беременности. Только вместо урины используется кровь. Результат будет зависеть от вида приспособления и правильности проведения процедуры.

Анализ крови РПГА: виды и эффективность тестов, достоверность результата и стоимость

Различают несколько разновидностей тестов. Они могут быть трепонемными и нетрепонемными. Первые являются очень специфическими, потому отсеивание здоровых людей происходит тщательно. Единственный их недостаток — пониженная чувствительность на ранних стадиях.

Анализ крови РПГА (расшифровывается аббревиатура, как реакция пассивной гемагглютинации) — специфический тест. Заключается метод в склеивании красных кровяных телец, на поверхности которых скапливаются антигены возбудителя. Подобная реакция происходит при добавлении крови инфицированного, которая содержит антитела к спирохете.

Что касательно чувствительности анализа крови РПГА и подобных тестов, в частности РИФ, то на ранних стадиях она составляет порядка 70-80%, на более поздних — 99%.

Анализ крови РПГА — далеко не единственный качественный метод, позволяющий определить болезнь. Не менее эффективным является ИФА. При помощи иммуноферментного анализа можно выявить антиген и антитела к ним, возбудителей самых разных инфекционных недугов. ИФА — это и скрининговый и подтверждающий способ одновременно. Этот метод способствует выявлению любой половой инфекции, а также сифилис на любом этапе его развития.

Применение нетрепонемных тестов

Помимо трепонемных тестов, в частности анализа крови РПГА выделяют еще и нетрепонемные. Такие приспособления способствуют обнаружению в сыворотке антител к фосфолипидам, разрушающимся из-за недуга. Подобные приспособления стоят дешевле, чем трепонемные. Для их проведения используется не белок-антиген (являющийся специфическим для трепонемы), а его альтернатива (кардиолипиновый антиген).

Из-за высокой чувствительности результат исследований часто ложноположительный. Применение таких тестов рекомендовано при массовом скрининге населения. Если же возбудитель выявлен, проводится повторная проверка, но уже с применением трепонемного теста.

Характеристики самых эффективных тестов

Сегодня существует много тестов для определения венерической патологии.

К самым точным и проверенным относят следующие виды:

Креатив МП-сифилис. Высокоэффективный и чувствительный тест (99%) с наличием двойной комбинации антигенов. Определяет антитела к возбудителю сифилиса, как в крови, так плазме и сыворотке. Для проведения исследования используется пара капель цельной крови. Результат можно узнать по истечении десяти минут. О наличии в организме трепонем будет сигнализировать появление двух розово-фиолетовых полос. Если в области контроля есть только одна полоска — человек здоров.
Cito Test Syphilis. Этот тест является иммунохроматографическим. Оснащен тест кассетой, буфером, пипеткой. Все остальное нужно докупить. Примерно через десять минут после анализа можно узнать результат. Наличие двух четких линий сигнализирует о наличии патологии.
ИммуноХром — антиТР-Экспресс. Выявляет антитела к возбудителю сифилиса. Результат можно узнать по истечении четверти часа. Об инфицировании сигнализирует появление двух фиолетовых полосок. В комплект входят: буфер, спиртовые салфетки, пипетка, тест полоска, скарификатор.
Сифилис-тест. Набор реагентов способствует определению антител к трепонеме способом ИХА (иммунохроматографического анализа). Наличие двух параллельных полос свидетельствует о наличии сифилиса. Результат можно узнать через десять минут.
Профитест. Тест с чувствительностью в 99.5%. В комплекте: тест кассета, ланцет, пипетка, спиртовые салфетки. Результат будет известен по истечении четверти часа. Наличие двух полос сигнализирует об инфицировании.

Следует знать

Зачастую результаты исследований точные. Ложным или недостоверным результат может быть из-за неправильного проведения процедуры.

Причины ложноотрицательного результата

Ошибочный результат теста на сифилис может быть обусловлен:

истекшим сроком годности;
приемом антибактериальных препаратов;
расшифровкой результата позже рекомендуемого времени;
неправильным хранением полоски;
проникновением посторонних жидкостей;
отсутствием на время исследования антигенов;
неправильным забором крови;
пониженной температурой теста;
вскрытием теста за три и более часов до исследования;
малым количеством биологической жидкости.

Причины ложноположительного результата

Невзирая на отсутствие патологии на момент исследования, вероятность получения ложноположительного результата имеется. Это может быть обусловлено: беременностью, наличием диабета, добро- или злокачественных опухолей, пневмонии, аутоиммунных патологий.

Помимо этого, ложный положительный результат может быть спровоцирован:

невенерическими трепонематозами;
преклонным возрастом;
наличием туберкулеза;
корью;
лептоспирозом;
наркоманией;
алкоголизмом.

Прежде чем ставить себе диагноз или опровергать его, пациенту следует обратиться к венерологу.

Цена, как хранить тест

Средняя стоимость экспресс-теста — 300 рублей. Хранить тест нужно герметично упакованным, при температурном режиме до 30 градусов. Заморозке тест не подлежит.